Biuret Reaktion - Eiweiss im Eiklar

Demonstrationsexperiment auf Video

Biuret Reaktion - Eiweiss im Eiklar

Lernziel: Nachweis von Peptiden und Proteinen

Peter Keusch

English version

Chemikalien:
1 M Natronlauge
1 M Kupfersulfat-Lösung
Glycin
Eiweiss (Eiklar)

Glaswaren:
3 Reagierkelche, graduiert 500 mL
1 Becherglas 500 mL
3 Bechergläser 50 mL
Messzylinder 100 mL
2 Vollpipetten 5 mL
1 Vollpipetten 10 mL
4 Vollpipetten 20 mL
Peleusbälle
5 Schnappdeckelgläser 20 mL
3 Glassstäbe

Gefahren und Sicherheitsmaßnahmen:

Natronlauge: Die Gefährlichkeit der Laugen beruht auf ihrer Ätzwirkung bis hinunter auf 5%-ige Lösungen. Alle Laugen besitzen die Eigenschaft, Eiweißstoffe zu lösen, was zu tiefen Gewebszerstörungen führen kann.

Schutzbrille und Schutzhandschuhe erforderlich!

Versuchsdurchführung:

Vorbereitung der Eiklar-"Lösung": Das Eiklar eines Eies wird in 300 mL Kochsalz-Lösung gelöst.

Drei Reagierkelche werden, wie in folgender Tabelle aufgelistet, beschickt. Die Lösungen werden mit einem Glasstab umgerührt.

Reagierkelch 1	400 mL Wasser	-	5 mL 1 M Kupfersulfat - Lösung	5 mL 1 M Natronlauge
Reagierkelch 2	400 mL Wasser	1 Spatel Glycin	5 mL 1 M Kupfersulfat - Lösung	5 mL 1 M Natronlauge
Reagierkelch 3	400 mL Wasser	30 mL Eiklar - "Lösung"	20 mL 1 M Kupfersulfat - Lösung	40 mL 1 M Natronlauge

Versuchsergebnis:

Reagierkelch 1	Wasser	hellblauer Niederschlag
Reagierkelch 2	Glycin	blaue Lösung
Reagierkelch 3	Eiklar	blauviolette Lösung

Videoclip (Download RealPlayer .rm-Datei)

Deutung des Versuchsergebnisses:

Peptide und Proteine (langkettige Polypeptide) reagieren mit Cu ²⁺ im alkalischen Medium unter Bildung eines blauvioletten Chelatkomplexes mit einem Absorptionsmaximum bei 540 nm (Kelch 3). Das Peptid muß mindestens drei Peptidbindungen besitzen.

Aminosäuren bilden mit Cu²⁺- Ionen einen blauen Komplex (Kelch 2).

Der Biuret-Test dient zur quantitativen photometrischen Proteinbestimmung. Die Intensität der Farbe des Chelatkomplexes ist der Anzahl der an der Reaktion beteiligten Peptidbindungen proportional.

Liste der Experimente